腦切片是神經科學研究中的重要技術，指將大腦組織切割成薄片，用于觀察細胞結構、神經連接或病理變化。核心步驟包括取材、固定、切片、染色和成像，常用方法有冷凍切片和石蠟切片，應用涵蓋疾病診斷、腦功能研究及藥物開發。
小鼠小腦切片取自雄性和雌性正常型及Ube3a?/? P9-P11小鼠幼崽，如前所述。簡而言之，小腦矢狀面切片（300-μm厚）是在MacIlwain組織切割器上切割的，并轉移到具有0.4-μm孔徑的30-mm Millipore培養插孔的膜上。切片在六孔板中保持培養，培養基為1ml [MEM（Thermo Fisher Scientific, 32360-026）補充25%馬血清（Life Technologies, S-HS-EU-015），25%漢克平衡鹽溶液（Invitrogen, 14025092），1% P/S，1% Glutamax（Sigma, 35050-038），1.3%葡萄糖（Sigma, G8644）和1.1% 1M HEPES（Thermo Fisher Scientific, 15630-080），在37°C, 5%的CO2環境下培養。
為了清除巨噬細胞細胞，切片在分離后立即用荷蘭Liposoma品牌的氯膦酸鹽鹽脂質體clodronateliposomes或空脂質體（0.5 mg/ml, LIPOSOMA）處理24小時。然后通過在切片上方添加4×103 LPS（100 ng/µl, Sigma, 437627, 18小時）或IL4刺激（20 ng/µl, Peprotech, 214-14, 18小時）正常型或Ube3a?/? BMDMs的1.5 μl滴液直接補充切片，而不接觸切片。切片恢復2天后，采用溶血卵磷脂（0.5 mg/ml, Sigma, 62963）處理切片16小時以誘導去髓鞘化。隨后，切片被洗滌并在培養中保持6天，然后進行組織學和生化分析。
clodronateliposomes體外清除小鼠腦切片巨噬細胞解決方案：
1. 切片厚度：300μm
2. 濃度：0.5mg/ml
3. 用量：培養基體積1ml，清除劑濃度5mg/ml。即每孔1ml培養基加100ul清除劑clodroanteliposomes（Liposoma，C-005）
4. 時間：24h
clodronateliposomes體外清除小鼠腦切片巨噬細胞效果檢測：
如圖：巨噬細胞marker為F4/80，顯示為紅色。通過荷蘭Liposoma的Clodronateliposomes（C-005）處理后，腦切片上的巨噬細胞幾乎全部清除。
論文信息：
論文題目：UBE3A promotes foam cell formation and counters remyelination by targeting ABCA1 for proteasomal degradation
期刊名稱：Nature Communications
時間期卷：16, Article number: 8077 (2025)
在線時間：2025年8月29日
DOI：doi.org/10.1038/s41467-025-62053-w
產品信息：
貨號：CP-005-005
規格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
產地：荷蘭
名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes
辦事處：Target Technology(靶點科技)
Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體清除泡沫巨噬細胞，泡沫巨噬細胞含有過量的細胞內來源于髓鞘的脂質，導致多發性硬化癥（MS）等神經退行性疾病的病理。雖然對富含脂質的結構，如改良的脂蛋白和髓鞘的攝取，將巨噬細胞表型重塑為通常與組織修復和免疫抑制相關的表型，但這種解決疾病的表型僅是短暫的。我們和其他研究者發現，巨噬細胞中髓鞘來源脂質的過度積累，尤其在衰老過程中，使泡沫細胞傾向于更具炎癥性和促進疾病的表型。這種有害表型的誘導與大腦修復模型中損傷恢復受損密切相關。從機制上講，細胞內脂質的新陳代謝失調，主要由于膽固醇外流減少，導致細胞脂質含量失衡和有害泡沫巨噬細胞亞群的發展。荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：氯膦酸鹽脂質體clodronateliposomes體外清除腦切片Cerebellar brain slices 巨噬細胞。
